Tru (Eliza Dushku, „Dollhouse”) jest inteligentną i seksowną, świeżo upieczoną absolwentką college’u. Gdy przepada jej medyczny staż, rozpoczyna pracować na nocną zmianę w miejscowej kostnicy. Pewnej nocy Tru zaczyna wątpić w rzeczywistość, kiedy wydaje jej się, że słyszy, jak ofiara mordercy prosi o pomoc. Ale gdy budzi się następnego ranka, okazuje się, że to ten sam dzień – 12 godzin przed zabójstwem, o którym wie tylko Tru.

Czas goni, a Tru podróżując po mieście próbuje w ciągu następnych 12 godzin zapobiec tragedii. W międzyczasie musi również uchronić swoich bliskich od niebezpiecznego i destrukcyjnego trybu życia jaki prowadzą. Z dużym powabem i szybkością jak w „Biegnij, Lola, biegnij”, z tykającym zegarem jak w „24 godziny”, „Prawdziwe powołanie” na nowo pokazuje kryminalny gatunek.

W serialu Tru jest otoczona przez grono najbliższych: Harrisona (Shawn Reaves) – przystojnego i czarującego młodszego brata, który ma talent do pakowania się w kłopoty; Meredith (Jessica Collins), ich starszą siostrę, która robi karierę i świetnie zarabia, ale zmaga się z uzależnieniem od narkotyków; Lindsay (A.J. Cook), lojalną i nieświadomą przyjaciółkę Tru oraz Davisa (Zach Galifianakis, „Kac Vegas”), dziwacznego pracownika kostnicy. Widzowie zobaczą również znanego z popularnego serialu „Beverly Hills 90210” Jasona Priestleya w roli Jacka Harpera.